تم تقليل وقت الفحص بشكل كبير من حوالي ساعة إلى بضع دقائق بواسطة طريقة RTF-EXPAR المُبلغ عنها حديثًا والتي تستخدم نهجًا خاليًا من النسخ العكسي (RTF) لتحويل RNA إلى الحمض النووي متبوعًا بـ EXPAR (تفاعل التضخيم الأسي) للتضخيم عند درجة حرارة واحدة.
التحكم في معدل كوفيد-19 يتطلب الانتشار استراتيجية دقيقة وأسرع لاختبار الفيروسات. RT-PCR (تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي)، فإن طريقة الاختبار الأكثر دقة المستخدمة حاليًا هي اختبار من خطوتين يستغرق حوالي 60 دقيقة لكل عينة.
أبلغ الباحثون من جامعة برمنغهام عن طريقة جديدة للكشف عن فيروس SARS-CoV-2. يمكن أن يتيح ذلك إجراء اختبار أسرع بكثير ويكون حساسًا بدرجة كافية.
كشف الحمض النووي الريبي الفيروسي بواسطة RT-PCR (تفاعل البلمرة المتسلسل العكسي للنسخة العكسية) يتضمن تحويل الحمض النووي الريبي الفيروسي إلى الحمض النووي التكميلي (cDNA) متبوعًا بتضخيم (كدنا) بواسطة PCR الكمي (qPCR). ثم يتم الكشف عن [كدنا] باستخدام صبغة الفلورسنت. هذا يستغرق ما يصل إلى ساعة.
تم تقليل وقت الفحص بشكل كبير من حوالي ساعة إلى بضع دقائق بواسطة طريقة RTF-EXPAR المُبلغ عنها حديثًا والتي تستخدم نهجًا خاليًا من النسخ العكسي (RTF) لتحويل الحمض النووي الريبي (RNA) إلى الحمض النووي متبوعًا بـ EXPAR (تفاعل التضخيم الأسي) للتضخيم عند درجة حرارة واحدة. إن التضخيم الذي يحدث عند درجة حرارة واحدة هو مفتاح السرعة، لأنه يتجنب خطوات التسخين والتبريد الطويلة لـ RT-PCR. علاوة على ذلك، فإن قسم الحمض النووي الذي يتم تضخيمه أصغر مقارنة بـ RT-PCR. وبالتالي، يقوم EXPAR بتوليد ما يصل إلى 108 شريطًا من منتج الحمض النووي في دقائق قليلة. تتم مراقبة التكوين المزدوج، كما هو الحال في طريقة RT-PCR باستخدام صبغة الفلورسنت، SYBR Green.
ومن المثير للاهتمام ، أنه يمكن تعديل الطريقة الجديدة لاكتشاف العديد من الأمراض المعدية الأخرى التي تسببها فيروسات الحمض النووي الريبي ، على سبيل المثال الإيبولا ، الفيروس المخلوي التنفسي الخ.
المصدر (ق):
كارتر وآخرون (2020). اكتشاف أقل من 5 دقائق لـ SARS-CoV-2 RNA باستخدام تفاعل التضخيم الأسي الخالي من النسخ العكسي ، RTF-EXPAR. ما قبل الطباعة. نُشر في medRxiv تم النشر في 04 يناير 2021. DOI: https://doi.org/10.1101/2020.12.31.20248236
***
