تتم مراجعة وتقييم الاختبارات المعملية لتشخيص COVID-19 المطبق حاليًا وفقًا لنصائح هيئات الخبراء الدولية.
COVID-19 مرض، التي نشأت في ووهان الصين ، أثرت على أكثر من 208 دولة حتى الآن. لقد واجه المجتمع العلمي في العالم بأسره تحديًا كبيرًا في الأشهر القليلة الماضية ، للتطور الاختبارات التشخيصية For كوفيد-19 الكشف عن المرض من أجل فحص المرضى والأفراد المشتبه بهم من أجل إدارة الجائحة ومكافحتها بشكل فعال.
قبل تقييم الأساليب والممارسات الحالية المستخدمة للكشف عن COVID-19 ، دعونا أولاً نفهم أسباب COVID-19 وكيف يطور المرء اختبارات تشخيصية لفحص المرضى لهذا المرض. ينتج مرض كوفيد -19 عن الحمض النووي الريبي الموجب الذي تقطعت به السبل فيروس التي هي حيوانية المصدر ، مما يعني أنها يمكن أن تعبر حواجز الأنواع من الحيوانات إلى البشر ، ويمكن أن تسبب للبشر أمراضًا تتراوح من نزلات البرد إلى أمراض أكثر خطورة مثل MERS و SARS. تم الآن تسمية الفيروس المسبب لـ COVID-19 بـ SARS-CoV-2 من قبل اللجنة الدولية لتصنيف الفيروسات (ICTV) ، لأنه مشابه جدًا للفيروس الذي تسبب في تفشي مرض السارس (SARS-CoVs). يمكن تطوير الاختبار التشخيصي لمرض COVID-19 بعدة طرق.
الطريقة الأكثر شيوعًا والمعتمدة حاليًا في جميع أنحاء العالم هي تطوير اختبار تشخيصي يمكنه اكتشاف فيروس SARS-CoV-2 نفسه. هذه تجربه بالعربي يعتمد على اكتشاف الجينوم الفيروسي في عينة المريض بواسطة RT-real time PCR (تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخة العكسية في الوقت الحقيقي). يستلزم هذا تحويل الحمض النووي الريبي الفيروسي إلى الحمض النووي باستخدام إنزيم يسمى النسخ العكسي ثم تضخيم الحمض النووي باستخدام مجموعة محددة من البادئات ومسبار الفلورسنت ، الذي يرتبط بمنطقة معينة على الحمض النووي الفيروسي ، باستخدام Taq polymerase ويكشف عن إشارة الفلورسنت. يشار إلى هذه الاختبارات باسم NAATs (اختبارات تضخيم الحمض النووي). يمكن أن تكون هذه التقنية مفيدة جدًا في الكشف المبكر جدًا عن وجود الحمض النووي في عينة المريض ، حتى في المرضى الذين لا تظهر عليهم أعراض مرض COVID-19 (خاصة في فترة الحضانة التي تتراوح من 14 إلى 28 يومًا) وفي الجزء الأخير وكذلك عندما يكتمل المرض.
تعمل العديد من الشركات في جميع أنحاء العالم في سباق مع الزمن خلال الأشهر القليلة الماضية لتطوير اختبار تشخيصي قائم على NAAT للكشف عن SARS-CoV-2 بناءً على إرشادات CDC (مركز السيطرة على الأمراض) ، أتلانتا ، الولايات المتحدة الأمريكية ومنظمة الصحة العالمية ( 1 ، 2). وافقت السلطات الصحية في جميع أنحاء العالم على هذه الاختبارات للاستخدام الطارئ للكشف عن SARS-CoV-2. تشمل الجينات الفيروسية المستهدفة حتى الآن جينات N و E و S و RdRP ، إلى جانب عناصر التحكم الإيجابية والسلبية المناسبة. عينات المريض التي سيتم جمعها لمثل هذا الاختبار هي من الجهاز التنفسي العلوي (مسحة البلعوم الأنفي والفم البلعومي) و / أو الجهاز التنفسي السفلي (البلغم و / أو نضح القصبة الهوائية أو غسل القصبات الهوائية). ومع ذلك ، من الممكن أيضًا اكتشاف الفيروس في عينات أخرى ، بما في ذلك البراز والدم. يجب جمع العينات بسرعة بطريقة مناسبة مع اتخاذ جميع الاحتياطات اللازمة والالتزام بممارسات السلامة الحيوية (وفقًا للإرشادات التي وضعتها منظمة الصحة العالمية [1]) ، من المرضى الذين يستوفون تعريف الحالة المشتبه بها لـ COVID-19 ، وحفظها وتعبئتها حسنًا إذا تطلب الأمر نقله إلى مركز التشخيص ثم معالجته (استخراج الحمض النووي الريبي في خزانة السلامة الحيوية في BSL-2 أو منشأة مكافئة) بسرعة بطريقة تضمن سلامة العينة. كل هذا يجب أن يتم على أساس الأولوية لتحسين الإدارة السريرية والسيطرة على تفشي المرض.
يختلف وقت الكشف عن العديد من الاختبارات المعتمدة على NAAT التي طورتها كبرى شركات التشخيص حول العالم من 45 دقيقة إلى 3.5 ساعة. يتم إجراء تحسينات مختلفة على هذه الاختبارات لتحويلها إلى اختبارات نقطة رعاية وتحقيق النتائج المرجوة في أقل وقت ممكن دون المساس بدقة النتيجة ، لزيادة عدد الاختبارات التي يمكن إجراؤها في يوم واحد.
خيارات الاختبار التشخيصية الأخرى هي اختبارات التشخيص السريع (RDTs) التي إما تكتشف المستضدات / البروتينات الفيروسية التي يتم التعبير عنها على سطح جزيئات فيروس SARS-CoV-2 لأنها تتكاثر في الخلايا المضيفة وتسبب المرض أو الأجسام المضادة المضيفة استجابة للعدوى ؛ يكتشف هذا الاختبار وجود الأجسام المضادة في دم الأشخاص الذين يُعتقد أنهم أصيبوا بـ COVID-19 (3).
تعتمد دقة واستنساخ اختبار RDT للكشف عن المستضدات الفيروسية على عدة عوامل بما في ذلك الوقت منذ بداية المرض ، وتركيز الفيروس في العينة ، ونوعية العينة ومعالجتها ، وصياغة الكواشف الموجودة في مجموعات الاختبار. بسبب هذه المتغيرات ، قد تختلف حساسية هذه الاختبارات من 34٪ إلى 80٪. العيب الرئيسي لهذا الخيار هو أن الفيروس يحتاج إلى أن يكون في مرحلته التكاثرية والعدوى من أجل اكتشاف البروتينات الفيروسية.
وبالمثل ، فإن الاختبارات التي تكشف عن الأجسام المضادة للمضيف تعتمد على قوة استجابة الجسم المضاد التي تعتمد على عوامل مثل العمر والحالة التغذوية وشدة المرض وبعض الأدوية أو العدوى التي تثبط جهاز المناعة. العيب الرئيسي لهذا الخيار هو أن الأجسام المضادة يتم إنتاجها على مدار أيام إلى أسابيع بعد الإصابة بفيروس SARS-CoV-2 ويجب على المرء الانتظار كل هذا الوقت لإجراء الاختبار. هذا يعني أن تشخيص عدوى COVID-19 بناءً على استجابة الجسم المضاد للمضيف لن يكون ممكنًا في كثير من الأحيان إلا في مرحلة التعافي ، عندما تكون العديد من فرص التدخل السريري أو الوقاية من انتقال المرض قد انقضت بالفعل.
حاليًا ، تمت الموافقة على اختبارات التشخيص السريع المذكورة أعلاه فقط في بيئة بحثية وليس للتشخيص السريري بسبب نقص البيانات (3 ، 4). مع توفر المزيد والمزيد من البيانات الوبائية لـ COVID-19 ، سيتم تطوير المزيد من اختبارات التشخيص السريع والموافقة عليها كنقطة رعاية في بيئة سريرية لأنها يمكن أن تعطي نتائج في 10-30 دقيقة على عكس الاختبارات المعتمدة على NAAT والتي تستغرق في المتوسط ساعات قليلة لاكتشاف المرض.
***
المراجع:
1. منظمة الصحة العالمية ، 2020. توصيات استراتيجية الفحوصات المخبرية لفيروس كوفيد -19. التوجيه المؤقت. 21 مارس 2020. متاح على الإنترنت على https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf تم الوصول إليه في 09 أبريل 2020
2. CDC 2020. معلومات للمختبرات. إرشادات مؤقتة للمختبرات متوفرة على الإنترنت على https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html تم الوصول إليه في 09 أبريل 2020.
3. منظمة الصحة العالمية ، 2020. نصائح حول استخدام اختبارات نقاط الرعاية. موجز علمي. 08 أبريل 2020. متاح على الإنترنت على https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 تم الوصول إليه في 09 أبريل 2020.
4. ECDC ، 2020. نظرة عامة على حالة الاختبار السريع لتشخيص COVID-19 في الاتحاد الأوروبي / المنطقة الاقتصادية الأوروبية. 01 أبريل 2020. المركز الأوروبي للوقاية من الأمراض ومكافحتها. متاح على الإنترنت على https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea تم الوصول إليه في 09 أبريل 2020
***
